CRISPR/Cas9基因编辑技术（包含Base editor）专题讨论会（6.25-26 网络讨论会）

心技术的脱靶弊端

三、Cas受体的为了让

1、Cas受体的为了让

1.1、Cas受体的分类

1.2、三种应用于最普遍的Cas受体

1.3、Cas9受体的在结构上不同之处关的

1.4、Cas9受体与PAM序列

1.5、Cas9的mRNA简化与NLS

1.6、如何为了让Cas受体？

2、Cas受体自然资源查询

3、以上素材特别检验的需注意、检验熟练、检验结果请教

第一天凌晨13:30-17:00

四、CRISPR（gRNA）的设计者与化学合成

1、设计者gRNA前无需未确定的却说（校对思路的为了让、性状在结构上量化及查询步骤）

2、RNA的设计者（该软件互动设计者两栖作战）

3、gRNA暗示多种表现形式的重构

3.1、gRNA的体外暗示（RNP）

3.2、gRNA细胞内暗示多种表现形式重构

3.3、常见gRNA/Cas受体暗示多种表现形式

4、以上素材特别检验的需注意、检验熟练、检验结果请教

五、gRNA活性扫描

1、 Indel子代扫描的基本思路

1.1、错配内切酶法律条文（EMC）

1.2、TIDE/ICE量化法律条文

1.3、TA莱卡法律条文

1.4、酶切相片长度同源性法律条文（RFLP）

1.5、其他步骤

2、基于胚胎的活性验证步骤

3、以上素材特别检验的需注意、检验熟练、检验protocol、检验结果请教

六、性状校对辅助工具Cas12a(Cpf1)

1、Cpf1的发现

2、Cpf1与Cas9的不同点

3、Cpf1的应用于例子

4、Cpf1可同时抑制多个性状的校对

第二天傍晚8:30-11:30

七、套用CRISPR/Cas9核心技术创建性状一组校对细胞内系

1、期望性状的性状一组构成量化

1.1 期望性状在意在细胞内中所的暗示可能

1.2 如何未确定性状的不可忽视的功能域

1.3 可控摄像及多mRNA本

2、性状一组校对思路设计者

2.1性状敲除

2.2性状敲入

2.3驻点子代

2.4大相片删去

3、sgRNA的设计者与活性验证

3.1 如何为了让所在位置合适的gRNA？

4、用于性状敲入的专小底物DNA的设计者

4.1 Donor DNA的表现形式

4.2 适用ssODN作为Donor

4.3 设计者ssODN的要点

4.4 接在碱基与DSB碱基赞同的可能

4.5 接在碱基与DSB碱基不赞同的可能

5、核酸（和/或专小底物）导入细胞内系的步骤（脂质体转染，电转，病毒转导）

6、非典型莱卡抽选出

6.1 抗生素抽选出（Protocol）

6.2 抽单细胞内莱卡（Protocol）

6.3 性状型比对

6.4根据射击训练经济性估算无需抽选出的莱卡量

6.5 有限酒精法律条文酒精细胞内的流程（Protocol）

6.6 性状型比对

7、性状一组校对细胞内系的建立

8、提高性状敲入（分化成重一组）经济性的思路

9、以上素材特别检验的需注意、检验熟练、检验protocol、检验结果请教

八、CRISPR/Cas系统设计抑制的性状校对例子参阅

1、CRISPR除此以外工作流程

2、Knock-out例子1

3、Knock-out例子2

4、Knock-in例子

第二天凌晨13:30-17:00

九、套用CRISPR核心技术创建性状一组校对鸟类

1、CRISPR/Cas步骤与传统步骤的相比较较

2、性状校对鸟类化学合成流程

3、通过光学服用法律条文化学合成性状校对小鼠

3.1、小鼠的超排和光学服用

3.2、胚胎移植和性状型比对

3.3、光学服用法律条文授予的性状校对鸟类的比对

4、通过卵母细胞内莱卡法律条文化学合成性状校对鸟类

4.1、专供卵母细胞内分离、培育

4.2、专供卵母细胞内的性状校对

4.3、卵母细胞内核移植转换

4.4、胚胎移植

4.5、性状校对个体的比对和扩繁

十、CRISPRmRNA抑制/mRNA抑制以及CRISPRscreen

1、dCas9的特征关的

2、套用CRISPR核心技术同步进行mRNA管控的基本原理

3、CRISPRmRNA抑制/mRNA抑制核心技术及简化

4、CRISPRoff

5、CRISPR screen及CRISPRa/iscreen（高通量抽选出）

十一、单序列校对与单序列校对器（CBE、ABE、PE）

1、 单序列校对器的基本原理

2、 单序列校对器的简化

3、 先导校对核心技术基本原理及其应用于

十二、性状校对核心技术的脱靶弊端

1、 脱靶诱发的因素

2、 性状校对辅助工具的脱靶可能但会

3、 脱靶扫描步骤

4、 如何降低脱靶？

十三、Cas12和Cas13受体及其应用于

1、 Cas12和Cas13与Cas9的差异性

2、 Cas13不同之处及其在蛋白质扫描中所的应用于

3、 SHERLOCK及DETECTR系统设计基本原理

十四、性状校对核心技术特别自然资源

参阅CRISPR/Cas系统设计以及性状校对特别的核酸、gRNA、文库、细胞内、Protocol以及核心技术blog等自然资源。

但会务对系统设计

时间附近：

2022/6/25-26 2022/7/23-24

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